Nejat İşler, 28 Şubat 1972 tarihinde İstanbul, Türkiye'de dünyaya geldi. Eyüp semtinde doğan Nejat İşler'in babası da dedesi de işçi olup kendisi soyadını dedesinin Feshane'deki sayacılık işinden aldığını söylemektedir. İşler, ilkokul sonrasında Cağaloğlu Anadolu Lisesi'nde eğitimine devam etti. Başlangıçta ortamına hiç alışamadığı yeni okulunda gözde bir öğrenci olabilmek ve yoğun derslerden kaçabilmek amacıyla tiyatro koluna girdi. Karziması ile kısa bir sürede gözde bir öğrenci haline gelen Nejat İşler, bu esnada okuldaki derslerine yeterince önem vermemeye başladı. Lise mezuniyeti sonrasında üniversite sınavlarında başarı gösteremeyince para kazanabilmek amacıyla çay parti ve organizasyonları düzenlemeye koyulan Nejat İşler, bu işte de aradığını bulamayıp borçlandı. Borçlarını kapatabilmek ve para kazanabilmek için Mahmutpaşa'dan ucuza aldığı t-shirtler, kitap ve cd'leri Teşvikiye'de satmaya başladı. İki sene kadar bu işle uğraşan İşler, sonrasında Yıldız Teknik Üniversitesi Fotoğrafçılık bölümünü kazandı ancak askerliz hizmetini yapmak için okula gitmekten vazgeçti. Taksim'de dolaştığı günlerinde birinde 27 Mart Dünya Tiyatrolar Günü'nde bedava gösterime girmiş olan "Danton'un Ölümü" adlı oyunu izlerken aklına bu işin kendisi için uygun bir iş olabileceği fikri girdi. Dayısını ziyarete gitmiş olduğu bir sırada konservatuvar sınavlarına girmeye karar verdi. İstanbul'a döndüğünde Mimar Sinan Üniversitesi Konservatuvar Bölümü'ne başvurdu ve sınavı kazandı. Üniversiteden mezun olduğu yıl olan 1995 yılına kadar devlet tiyatrosunda ve çeşitli televizyon dizilerinde roller alan Nejat İşler, bir yandan da CD ve kitap sattığı işporta tezgahının başında durmaya devam etti. Mezuniyeti sonrasında yakın iki arkadaşı ile birlikte "Kahramanlar ve Soytarılar Tiyatrosu"'nu kurdu. Tiyatroda sergilemek amacıyla kendi oyunlarını yazmaya başladı. Aynı dönemde yazarlığını da geliştiren Nejat İşler, "Tuhaf Şehir Hikayeleri", "Biz Zavallı Erkekler" ve "Yalnızlık Benim Gizli Sevgilim" adlı üç kitap kaleme aldı. 41. Antalya Altın Portakal Ödülleri'nde En İyi Erkek Oyuncu dalında aday gösterilmesi üzerine yaptığı bir açıklamada Nejat İşler, amacının asla şöhret olmak olmadığını ve tek arzusunun yaptığı iş olan tiyatro ve oyunculuğu en iyi şekilde yapmak olduğunu söyledi. 1994 yılında rol almış olduğu ilk televizyon dizisi olan "Gurur"'dan sonra, "Deli Yürek", Şehnaz Tango , "Nasıl Evde Kaldım", "Dedem", "Gofret ve Ben", "Aşk ve Gurur", "Şeytan Ayrıntıda Gizlidir" adlı dizilerde oynadı. Geniş kitlelere adını duyurmayı başardı iki dizisi ise "Gülbeyaz"​​​​Aliye dizileri olmuştur. 1999 yılında ilk uzun metrajlı sinema filmi olan "Eylül Fırtınası" adlı filmde rol almış olan Nejat İşler, sonrasında Mustafa Hakkında Her Şey ve "Anlat İstanbul" adlı filmlerle sinema oyunculuk kariyerine devam etti. Geçirmiş olduğu ağır rahatsızlık nedeniyle sinema ve oyunculuk kariyerine ara vermiş olan Nejat İşler, sakin bir hayat sürmek amacıyla Bodrum'da kurduğu bir dükkanın işletmeciliğini yapmaktadır.